一、用血细胞计数板计数酵母菌数量时统计方格内细胞数 为什么偏小?
原因有好几种：1，在你取液时未摇匀，吸取的那些作为统计的液中酵母菌偏小。
2、你在计数时，未及边缘的（计数原则，计上不计下，计左不计右）3、你在调显微镜时焦距未达到计数板槽内，而是聚焦在盖玻片上（其上少）4、仪器问题和个人习惯等因素等。
二、同一种菌液用血球计数板和平板计数法同时计数，所测得的结果是否一样？为什么？
有可能不一样。
血球计数板能将死细胞计算在内 ，而平板计数法只能计数活细胞（只有活细胞才能在平板上长），故一般血球计数法要比平板计数法的结果大。
希望对你有所帮助。
三、微生物计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是？？
有些活菌在培养过程中死亡，另外有些菌落是有多个活菌共同形成的，所以按形成的菌落数目来计算活菌数目的话，结果往往会少于活菌实际数目。
四、6．一般1000mL熔化的固体培养基可以倒多少个90mm平板？涂平板计数时，为什么菌落分布不均匀？如何改进？
一般10mm左右的平板需要10~15ml的固培，稍厚些可以倒上20ml。
那么1000ml可以一般可以倒50块平板以上。
平板固培厚度还要看你具体需要了，你想时间放长那可以倒厚点。
太薄的平板不要冒险用哦，小心菌长起来之前平板就先干掉！菌落不均匀我帮你分析下，你参考看看吧。
①平板底部补平，培养基也不够厚；
或者倒培养基的时候有部分凝固，导致表面坑坑洼洼的，涂板之后部分区域过多的菌液堆积。
建议平板倒厚点点，4~5mm左右高度。
②菌液涂布是不是过多了，我觉得平时100~200ul涂布起来比较舒服，液体太多也会导致菌体分布不均。
还有菌体吹散均匀后再涂板。
如果真的菌液涂得多了，那么正放时间久些，让平板充分吸收。
吸收的时候要注意台面需要水平，倾斜了肯定会局部菌落密度高。
涂板的时候要注意涂布均匀。
③是不是抗性加入培养基后未充分混匀，导致部分培养基抗性过低或过高。
就这几点你考虑下吧。
五、平皿沉降法测定的结果与空气中实际细菌数相比有何关系
就一般情况而言，通过平皿沉降法测定的菌落可以反映空气中的实际细菌数，细菌越多，那么测定的菌落值就越高。
但这并不是绝对的，比如在需氧的营养琼脂上不生长的细菌就无法测定出。
六、稀释涂布平板法测定活菌的数目为什么比实际的少
统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，原因是当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落数。
七、稀释倒平板法和涂布平板法菌落计数有分别吗
微生物计数采用稀释倒平板法要选择30~300之间菌落的平板计数的原因主要是：菌数超过300的是很难计数的；
而不足30时，则会造成巨大的统计偏差。
八、平板菌落计数法下分几种类型，每种类型的操作步骤分别是什么，优缺点分别是什么？
1、平板倾注法 1）、以无菌操作，将检样25g（或25ml）剪碎放于含有225ml灭菌生理盐水的广口瓶内（瓶内置有适量玻璃珠）或灭菌研钵内，经充分振摇或研磨用成1：10的均匀稀释液。
2）、用1.0ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1.0ml，沿管壁徐徐注入含有9.0ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内液面），振摇试管混合均匀，作成1：100的稀释液。
3）、另取1.0ml灭菌吸管，按上述操作作10倍稀释，如此每递增稀释一次，即换1支1.0ml吸管。
4）、根据食品卫生要求或对标本污染程度的估计，选择2-3个适宜稀释度，分别作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释液的吸管移1.0ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。
5）、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃营养琼脂（可放于46×1℃水浴保温）注入平皿约15ml，并移动平皿使混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1.0ml灭菌生理盐水的平皿内作空白对照。
6）、待稀释液入平皿后，翻转平板，置36×1℃温箱内培养24±2h（肉、水产品、乳和蛋品为48±2h）取出，计算平板内菌落数，乘以稀释倍数，即得每克（或ml）样品所含菌落总数。
2、平板表面涂布法 将营养琼脂制成平板，经50℃l一2小时或35℃18—20小时干燥后，于其上滴加检样稀释液0．2ml，用L捧涂布于整个平板的表面，放置片刻(约lO分钟)，将平板翻转，移至36±1℃温箱内培养24±2小时(水产品用30℃培养48±2小时)，取出，按前述方式进行菌落计数，然后乘以5(由O．2m1换算为1m1)，再乘以样品稀释的倍数，即得每g或m1 检样所含菌落数。
此法较上述倾注法为优，因菌落生长在表面，便于识别和检查其形态，虽检样中带有食品颗粒也不会发生混淆，同时还可使细菌不必遭受融化琼脂的热力，不致因此而使菌细胞受到损伤而不生长，从而可避免由于检验操作中的不良因素而使检样中细菌菌落数降低。
但是本法取样量较倾注法为少(仅倾注法的五分之一)，代表性将受到一定的影响。
3、平板表面点滴法 与涂布法相似。
所不同者，只是用标定好的微量吸管或注射器针头按滴(使每滴相当于0．025mi)将检样稀释液滴加于琼脂平板上固定的区域(预先在平板背面用标记笔划成四个区域)，每个区域滴1滴，每个稀释度滴两个区域，作为平行试验。
滴加后，将平板放平片刻(约5～10分钟)，然后翻转平板，如前移入温箱内培养6～8小时后进行计数，将所得菌落数乘以40(由o.025ml换算为1ml)，再乘以样品稀释的倍．数，即得每g或ml检样所含菌落数。
李兆普等利用此方法，与倾注法进行对比试验，经过六种食品，1536件检样的考核结果，倾注法低于点滴法及涂抹法。
本法具有快速、节省人力物力，适于基层单位和食品厂内部测定细菌总数用。
但此法取样量少，代表性可能受到影响。
又食品中细菌数少于3000/g（ml）者受到限制。
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参考文档
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